课程

细胞生物学实验技术

题目

细胞吞噬活动的观察

学时

讲授

0

实验

3

练习

0

行课时间

2015年4月 20日 第3节 至 第5节

课次

第 4次

教 材

《医学生物学与细胞生物学实验指导》 

李虹，梁素华主编，科学出版社，2014.06  第二版

教 具

显微镜、小白鼠、载玻片、盖玻片等及教学多媒体

教 学

目 的

要 求

掌握：巨噬细胞的吞噬活动过程

熟悉：细胞吞噬活动的诱发机理

了解：细胞吞噬活动与溶酶体的关系

教学重点

难点及其

解决方案

教学重点：细胞吞噬活动的观察

教学难点：细胞吞噬活动标本的制备

解决方案：通过预实验、讲述、操作等方法掌握

参 考

资 料

《细胞生物学实验技术》 章静波等主编，化学工业出版社，第2版，2011

《医学细胞生物学》胡火珍等主编，科学出版社，第7版，2014

实 施

情 况

小 结

教学过程、内容及时间分配

教学方法与手段

细胞吞噬活动的观察

一、理论讲述：                                              （10′）

1、巨噬细胞是机体内的一种重要的免疫细胞，具有非特异性的吞噬功能。

2、巨噬细胞来自骨髓的前单核细胞，发育成熟后释放到血液中成为单核细胞，在全身各组织进一步分化成各种组织的巨噬细胞。巨噬细胞在不同组织中的名称不同：在肺里称“肺巨噬细胞”；在神经系统里称为“小神经胶质细胞”；在骨里则称为“破骨细胞”。 

3、体积较大，形状不规则，常伸出短而钝的突起，作变形运动。

4、吞噬过程：当机体受到细菌等病原体和其它异物入侵时，巨噬细胞将向病原体或异物游走（趋化性），当接触到病原体或异物时，伸出伪足将其包围并进行内吞作用，将病原体或异物吞入细胞，形成吞噬泡，进而初级溶酶体与吞噬泡发生融合，将异物消化分解掉。

    5、此次试验的目的就是要观察巨噬细胞的吞噬活动现象，理解免疫系统发挥作用的机制

二、实验操作                                             （90′） 

1、巨噬细胞的诱生：在实验前三天，每天向小白鼠腹腔注射6%的淀粉肉汤1ml （含0.4%台酚蓝），以刺激小白鼠的腹腔产生较多的巨噬细胞（该步骤由实验准备组完成）。

提问——为什么要用台盼蓝（也称台酚蓝）染色

2、 鸡红细胞悬液注射：每组取一只经上述处理的小白鼠，腹腔注射1%鸡红细胞悬液0.5ml ～1ml ，然后轻揉小鼠腹部，使鸡红细胞分散。

3、处死：30分钟后，用颈椎脱臼法处死小鼠。

提问——为什么要等待30分钟

4、取材： 迅速剖开腹腔，往腹腔中注入0.5ml 生理盐水，用牙签轻轻将腹腔液和生理盐水混合均匀，用未装针头的注射器抽取腹腔液。

5、制装片：将腹腔液滴在载玻片上，然后盖上盖玻片，每人制片一张。

6、镜检：结合实验结果的描述，镜下观察分析。

小结                                                     （20′）

 1、巨噬细胞结构如何？吞噬过程是如何发生的？

2、此实验成功的关键

3、思考巨噬细胞吞噬异物后将诱发什么机制处理异物？

习题

绘制并描述观察到的巨噬细胞吞噬活动过程

板书设计：

                 细胞吞噬活动的观察

一、 细胞吞噬：巨噬细胞、溶酶体

二、 巨噬细胞的诱生：台酚蓝染色的淀粉

三、 鸡血细胞的注射

四、 解剖、取材、制作临时装片、镜检

讲授法

让学生理解观察对象的特性

实验步骤1由学生提前3天分组完成，也是检验学生医学机能实验学的一种手段，教师当场辅导学生学习腹腔注射方法

讲述操作过程，掌握动物处死的方法

操作法

讨论法