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1细胞的形态结构和显微测量
2015-07-25 16:13  

      案 首 页

 

    2014级   生物技术专业本科班                     任课教师: 杨雨晗

课程

细胞生物学实验技术

题目

细胞的形态结构和显微测量

学时

讲授

0

实验

3

练习

0

行课时间

20153月 30日 第3节 至 第5

课次

第 

教 材

《医学生物学与细胞生物学实验指导》 

李虹,梁素华主编,科学出版社,2014.06  第二版

教 具

显微镜、目镜测微尺、物镜测微尺、玉葱鳞叶、载玻片、盖玻片、牙签

教 学

目 的

要 求

掌握:光学显微镜下真核细胞的基本形态结构;临时装片的制作;细胞的显微测量方法

 

熟悉:光学显微镜的使用;生物绘图的方法

 

了解:观察的标本细胞的基本形态结构和大小

教学重点

难点及其

解决方案

教学重点:真核细胞的基本形态结构

 

教学难点:显微测量的方法

 

解决方案:通过演示实验、操作、小组教学等方法掌握

 

参 考

资 料

《细胞生物学实验技术》 章静波等主编,化学工业出版社,第2版,2011

 

《医学细胞生物学》胡火珍等主编,科学出版社,第7版,2014

实 施

情 况

小 结

 

 

教研室主任签名:                                                 201  年    月    日

      案 续 页

教学过程、内容及时间分配

教学方法与手段

细胞的基本形态结构和显微测量

一、课程要求                                              10

1、本课程对学生的要求:分班分组(49人,两个小班,基础性实验2人一组,综合性实验4人一组),分别由何浪老师和杨雨晗老师带教。

2、生物技术实验室的要求:实验准备要求、课堂要求、清洁卫生要求。每次实验结束后上交实验报告。

3、实验报告的书写要求:不能漏项目,包括实验时间、温度、湿度、实验报告完成时间等;图片的要求:真实绘制,铅笔,要有图片名称和放大倍数。

二、理论讲述:                                              20

(一)显微镜的基本使用方法

    打开电源、调节光线、放上标本、低倍镜观察、高倍镜观察、油镜观察、显微镜归位

(二)生物绘图要求:真实、科学;点、线;铅笔

(三)本实验内容

1、真核细胞(cell)的基本形态结构观察

(1)玉葱鳞叶表皮细胞标本的制备和观察

取一载片,擦拭干净;取蒸馏水一滴于载片中央,用解剖镊在玉葱鳞叶内侧撕下2mm~3mm的表皮 (越薄越好), 放于载片中央水滴内(若产生皱褶,可用解剖针或解剖镊展平),然后加盖片(注意不要产生气泡)作成临时制片。

在显微镜下观察其形态和细胞的基本结构

(2)人口腔粘膜上皮细胞标本的制备和观察

取载片、盖片各一张,擦拭干净,滴一滴蒸馏水于载片中央,取消毒牙签一根,轻轻刮取颊部任何一侧的上皮(下唇内侧亦可)。然后将取得的标本置于载片中央水滴内搅动几下,制成细胞悬液,甲基蓝染色,盖上盖片,置低倍镜下观察,可见呈不规则形、或扁平椭圆形、或多边形的细胞,单个或多个连在一起。这就是口腔粘膜上皮细胞。选择清晰而无重叠的细胞,移至视野中央,换高倍镜观察。在高倍镜下,可见细胞中央有一卵圆形的细胞核,细胞质均匀一致。

在显微镜下观察与玉葱鳞叶细胞比较,两者有何异同?

2、显微测量——测微尺法

测微尺分目镜测微尺和镜台测微尺,两尺配合使用。

(1)目镜测微尺:一块圆形玻璃,中心刻有一尺,长5-10mm,分成50-100格。每个所代表的实际长度因不同物镜的放大率和不同镜筒长度而异。需装配在目镜中使用。

(2)镜台测微尺:一块载玻片的中央,用树胶封固一圆形的测微尺,长1-2mm,分成100或200格。每格实际长度为0.01mm(10μm)。

(3)当用目镜测微尺来测量细胞的大小时,必须先用镜台测微尺核实目镜测微尺每一格所代表的实际长度。

 

方法如下: 

(1)将一侧目镜从镜筒中拔出,旋开目镜下面的部分,将目镜测微尺刻度向下装在目镜的焦平面上,重新把旋下的部分装回目镜,然后把目镜插回镜筒中。 

(2)将镜台测微尺刻度向上放在  镜台上夹好,使测微尺分度位于视野中央。调焦至能看清镜台侧微尺的分度。 

(3)小心移动镜台测微尺和转动目镜测微尺,使两尺左边的一直线重合,然后由左向右找出两尺另一次重合的直线。 

(4)记录两条重合线间目镜侧微尺和镜台侧微尺的格数。计算目镜侧微尺每格所代表的实际长度。目镜尺每格所代表的实际长度=(两重合线间镜台测微尺的格数/两重合线间目镜测微尺的格数)×10um 

(5)取下镜台侧微尺,换上需要测量的玻片标本,用目镜测微尺测量标本。

3、显微测量——软件image-pro测量法

(1)对要测量的图像拍照

(2)利用image-pro软件进行定量测量

三、实验操作                                             80 

1、玉葱鳞叶表皮细胞标本的制备和观察

2、人口腔粘膜上皮细胞标本的制备和观察

3、显微测量:由杨雨晗老师在精密室用image-pro软件讲解如何进行显微测量。并每组选一细胞标本测量其长短径的平均值。

小结                                                     10

1、显微镜使用的基本过程

2、生物绘图的基本要求,能用生物绘图的绘制镜下图像

    3、镜下细胞基本形态结构的辨识

4、显微测量的方法的比较

 

习题

    1、绘制两种真核细胞的形态结构图

2、选择自己制作的任一标本,测定五个细胞的平均直径(长短径)

板书设计:

                  细胞的基本形态结构和显微测量

一、 显微镜的使用过程

二、 生物绘图

三、 细胞形态结构的观察:

1、 玉葱鳞叶表皮细胞

2、 人口腔黏膜上皮细胞——自制

3、 临时装片的制作

四、 显微测量

1、 测微尺法:目镜测微尺、镜台测微尺

2、 软件测量法:image-pro

 

 

 

 

 

 

讲述法

 

举例法

列举学生实验报告书写容易出的问题

 

 

 

讲述法,演示显微镜的使用规范

 

生物绘图是重点,举例说明常见的错误

 

 

 

此实验要做临时装片,注意不要损害显微镜镜头,需滤纸。

 

 

 

演示临时装片的制作步骤和关键

 

 

注意:甲基蓝染色后背景要清洗

 

 

 

 

 

 

 

难点,详细讲述

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

注意:实验室的测微尺与实验室的大多数显微镜(麦克奥迪品牌)目镜不配套,不能使用,这里要求学生掌握其理论知识即可。

 

 

 

 

软件测量的方法更准确和方面,是使用时的重要方法

实验操作时分小组在精密室讲述测量过程

 

 

操作法

 

 

 

 

 

讨论法

 

 

 

 

 

 

 

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