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实验六 人类染色体G显带技术和G显带染色体的识别
2015-07-25 12:13  

成都医学院教案首页

2013级  生物技术专业本科班                                  任课教师:张坤      

课程

遗传学实验技术

题目

实验六   人类染色体G显带标本的制备及观察

学时

讲授

 

实验

3

练习

 

行课时间

2015618日第6-8

课次

6

教 材

《医学遗传学实验指导》第3版,主编:王修海,科学出版社,2012

教 具

多媒体,粉笔,实验材料

教 学

目 的

要 求

1. 掌握人类染色体胰蛋白酶法G显带技术。

2. 熟悉G显带染色体的主要特征。

3. 了解G显带技术在临床上的应用。

教学重点

难点及其

解决方案

重点:1、显带染色体的制作方法及原理

22122XY这几条染色体的带纹特征。

难点:1、胰酶最佳消化时间的摸索

      2、带纹的识别

解决方案:实际操作,边讲边演示

参 考

资 料

1、杨抚华.医学生物学(第七版).北京:科学出版社,2011

2、梁素华.医学遗传学(第三版).北京:人民卫生出版社,2013

实 施

情 况

小 结

 

教研室主任签名:                                                          

 

成都医学院教案续页

教学过程、内容及时间分配

教学方法与手段

【课前复习】1min

评讲上次报告中存在的典型问题,表扬完成较好的同学。

【新课引入】1min

    染色体带是在染色体的长轴上显现出的着色深浅不同的横纹。显带原理尚未完全弄清,从多种方法证实染色体上之所以能显示带纹是因为染色体本身存在着能显带的结构。用相差显微镜观察未染色的染色体时,就能直接观察到染色体的带;用特殊方法处理后,再用染料染色,染色体带更加清楚。

【讲解】37 min

(一)基本原理

    显带方法不同,带的特征也不一样,这说明带的出现又与染料特异性有关,一般认为易着色的阳性带是含有A—T多的染色体节段,相反G-C多的染色体节段不易着色。

    先将染色体标本片用胰蛋白酶处理,再用吉姆萨染色,即可在染色体的长轴上显出明暗相间的横纹,这种显带法称为G显带法。G显带应用最普遍。

(二)操作

1G显带染色体的制作

1)烤片  将上周四制作的标本片置入60℃烤箱中过夜

2)胰蛋白酶预温  将盛有0.025%胰蛋白酶溶液的染色缸置于37℃的恒温水浴箱内预温。

3)显带  将标本片浸入胰蛋白酶溶液中,轻轻连续摆动,处理时间20秒左右;因片龄超过1周,所以处理时间适当延长,精确时间需摸索。取出标本片,立即用蒸馏水轻轻地连续漂洗,去除片上的胰蛋白酶溶液。

4)染色  将标本片置于染色架上,用10%吉姆萨染液染色1520分钟。

5)镜检  先在低倍镜下,自上而下,自左自右地选择分散良好,没有染色体重叠,带纹清晰的5G带分裂相;然后转至油镜下观察,计数染色体数目,根据每号染色体的特征予以鉴别

2G显带染色体的识别

G显带染色体的带纹特征可参照人显带染色体标准带型图P13-15。  

学生操作】80min

   巡回指导学生,做得好的同学的装片作为示教。

【课堂小1min

总结实验,当堂收实验报告

板书提纲

一、目的要求

1. 掌握人类染色体胰蛋白酶法G显带技术。

2. 熟悉G显带染色体的主要特征。

3. 了解G显带技术在临床上的应用。

二、内容步骤

1)烤片60℃过夜

2)胰蛋白酶预温37

3)显带0.025%胰蛋白酶溶液20

4)染色10%吉姆萨染液染色1520分钟

5)镜检5G带分裂相

 

讲授法

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

示范显带操作

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

主板书一直保留,副板书即写即擦

 

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