| 实验一 标本片观察及环境微生物检测
光学显微镜的使用与标本片观察
一、实验原理（5分钟）
光线从标本玻片经空气进入镜头时，由于介质密度不同而发生折射现象，因此进入物镜中的光线很少。当使用高倍或低倍物镜时，透镜的孔径比较大，影响不显著；但油镜透镜孔径很小，射入镜内的光线很少，视野暗，物象模糊不清。如在玻片上加上折光率与玻片(n=1.52)相近的香柏油(n=l.515)，就可避免光线的分散，加强视野的亮度，获得清晰的物象。
二、实验方法
1．油镜的识别 （5分钟）
普通光学显微镜的构造(图1-1)。观察微生物标本最常用的是油镜，油镜头上标有100×或125×，镜头前端有黑或白色的圆圈，刻有“HI”或“oil”等，其孔径也较其他物镜小。
2．油镜的使用（55分钟）
(1) 对光：用低倍镜对光调至视野最亮，要抬高聚光器，放大光圈。以天然光线为光源时，使用平面反光镜；以灯光为光源时，使用凹面反光镜。
(2) 将标本固定在载物台上，先用低倍镜并找到标本之适当位置，然后换用油镜。
(3) 在玻片上滴香柏油1～2滴。用眼从侧方看着物镜，缓慢转动粗调节器，使物镜头浸于油滴内，并几乎与玻片接触为止，但切勿使两者相碰，防止损伤镜头或玻片。然后从目镜观察，仔细转动粗调节器，看到模糊物象时，再调动细调节器，使物象清晰。未能看到物象时，可重复上述操作。
(4) 观察标本时应两眼同时张开，左眼观察，右眼用于绘图并记录结果。
(5) 标本观察完毕，向上转动粗调节器将镜筒提起，取下标本，用擦镜纸将镜头上的油擦净。若油已干，可用擦镜纸沾少许二甲苯擦去油迹，随即用擦镜纸擦去二甲苯。
3．显微镜的保护（5分钟）
(1) 显微镜是贵重精密仪器，使用时要精心爱护，不得随意拆散和碰撞。
(2) 取送显微镜时，应右手持镜臂，左手托镜座，平端于胸前。
(3) 防止与强酸、强碱、乙醚、氯仿、酒精等化学药品接触。
(4) 擦镜头时，应顺其直径方向擦，不要转圈擦。
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