课程

生物化学与分子生物学实验

题目

血糖的测定

学时

讲授

0

实验

3

练习

行课时间

课次

教 材

《生物化学与分子生物实验学》，宋海星主编，科学出版社，2012年9月第一版

教 具

多媒体课件

教 学

目 的

要 求

掌握：吴宪－Folin法测定血糖的原理和操作；

熟悉：该法血糖测定的优缺点和样品处理；

了解：不同的血糖测定方法、应用范围及临床意义。

教学重点

难点及其

解决方案

重点：血糖测定的原理和临床意义

解决：理论课复习

难点：分光光度计的使用

解决：示教

参 考

资 料

1. 王镜岩主编，生物化学（第三版），高等教育出版社，2004年

2. 孙培龙、吴石金 主编，生物化学技术实验指导，化学工业出版社，2008年

3. 高继国、郭春绒 主编，普通生物化学教程实验指导，化学工业出版社，2009年

实 施

情 况

小 结

教学过程、内容及时间分配

教学方法与手段

一、介绍吴宪血糖测定法（5´）

吴宪：  我国著名生物化学家和营养学家

1912 年 美国麻省理工学院 学习化学

1917 年 哈佛大学医学院   师从美国著名生物化学家福林(Otto Folin）教授进行血液化学研究。研究期间改进血糖定量分析方法吴宪改进的血糖测定法，为后来的胰岛素发现奠定了基础。

二、实验内容（20´）

【原理】

无蛋白血滤液的葡萄糖，在碱性溶液中与硫酸铜共热，蓝色的二价铜即还原成砖红色的氧化铜沉淀，氧化铜再使磷钼酸还原成钼蓝，与同样处理的标准葡萄糖液比色，可求出血液中的葡萄糖含量。

【操作】

1．无蛋白血滤液的制备：取干试管一支，准确加入蒸馏水3.5ml，血液0.1ml，2/3 NH2＝SO4 0.2ml，10％ Na2WO4 0.2ml，混匀，待有澄清液出现后，过滤，收集滤液备用。

 2. 取试管三只，编号，按下表操作：

编号           标准管          测定管          空白管

标准葡萄糖         2.0             ——            ——

无蛋白滤液         ——           2.0              ——

蒸馏水             ——           ——             2.0

碱性铜试剂         2.0              2.0             2.0

充分摇匀，置沸水浴准确煮沸8分钟，取出切勿摇动，置于冷水浴中

磷钼酸试剂         2.0              2.0             2.0

蒸馏水             3.0              3.0             3.0

  将各试管摇匀后，用红色滤光片或620nm, 以空白管校零点，比色。

【临床意义】

1、正常值：    

（mmol/L）        正常　　怀疑　　　糠尿病 
　空腹血糖　　　　＜ 6.1　　6.1-7.0　　 ≥7.0  
　餐后两小时血糖　＜6.1　　 7.0-11.1　　≥11.1 
  服糖后两小时血糖＜6.1　　 7.8-11.1　　≥11.1

2、 若血糖超过160mg%可出现糖尿、糖尿病、甲状腺机能亢进，肾上腺皮质和髓质机能亢进等等，均可出现高血糖和糖尿。血糖低于70mg%，称为低血糖，多见于胰岛素分泌过多，肾上腺皮质机能减退，脑垂体前几页机能减退、甲状腺机能减退等。

讲述法：结合PPT进行讲解。

讲述法：结合PPT进行讲解。

教学过程、内容及时间分配

教学方法与手段

三、学生操作（90´）

学生分组操作

四、课程总结（5´）

   提出实验中，学生出现的问题并和学生一起讨论，到达解决问题的目的。

并，安排学生打扫清洁。

【思考题】

1. Folin-吴法测定血糖的优缺点是什么？

2. 进行比色法测定时，如果测得样品的A值超过100%，该如何处理，为什么？

板书概况：

                            标题：血糖的测定

一、 实验原理及操作讲解

1、 原理

2、 操作

3、 临床意义

二、 学生操作

三、 思考题

1、 Folin-吴法测定血糖的优缺点是什么？

2、 进行比色法测定时，如果测得样品的A值超过100%，该如何处理，为什么？

理论联系实际：分组操作

总结归纳法：总结本次课的重点内容。

提问法：通过问题让学生对本节课的内容理解的更加深刻。